成·人免费午夜无码视频蜜芽|边啃奶头边躁狠狠躁玩爽在水里面|国产成人无码区免费内射一片色欲|亚洲线精品一区二区三区影音先锋

歡迎光臨北京和一生物科技有限公司網(wǎng)站!
誠(chéng)信促進(jìn)發(fā)展,實(shí)力鑄就品牌
服務(wù)熱線:

18102086003

產(chǎn)品分類

Product category

技術(shù)文章 / article 您的位置:網(wǎng)站首頁(yè) > 技術(shù)文章 > 細(xì)胞凍存和復(fù)蘇常見問題!

細(xì)胞凍存和復(fù)蘇常見問題!

發(fā)布時(shí)間: 2023-12-05  點(diǎn)擊次數(shù): 593次

 

 

凍存細(xì)胞一般常用胎牛血清(FBS)和二甲基亞砜(DMSO)。血清是維持細(xì)胞生存環(huán)境;DMSO是冷凍保護(hù)劑,使細(xì)胞免受低溫冰晶形成、及滲透壓改變而導(dǎo)致的物理?yè)p傷;

細(xì)胞培養(yǎng)理論上基本建議的是兩種:70%培養(yǎng)基 + 10%DMSO+ 20%胎牛血清或者10%DMSO+ 90%胎牛血清 。

但經(jīng)過有些實(shí)驗(yàn)室經(jīng)過對(duì)比發(fā)現(xiàn):"10%的DMSO,90%的血清"復(fù)蘇效果相對(duì)比"70%培養(yǎng)基 + 10%DMSO+ 20%血清"好。

 

 

DMSO產(chǎn)品咱就不多說了,什么品牌都有,只要是選擇細(xì)胞培養(yǎng)級(jí)別的,效果應(yīng)該差不多。不過我用的是MP Biomedicals二甲基亞砜(DMSO),效果還可以。

對(duì)于胎牛血清的選擇就要相對(duì)謹(jǐn)慎了,市面上胎牛血清品牌可以說是魚龍混雜,剛看過新聞的客戶就會(huì)知道,高仿產(chǎn)品橫行。慎重起見,給大家推薦CellMax品牌胎牛血清,目前有澳洲血清(庫(kù)存緊張)和中國(guó)血源胎牛血清可供大家試用,購(gòu)買。

 

 

細(xì)胞凍存和復(fù)蘇需要注意哪些呢?

 

 

1、細(xì)胞本身的狀態(tài)

一般情況下細(xì)胞的復(fù)蘇還與原代細(xì)胞的活性有關(guān),如果要凍存的細(xì)胞懸液本身活性不高的話,后面復(fù)蘇的存活率也不高。

 

2、凍存細(xì)胞數(shù)量要足夠

無論你再怎么小心,細(xì)胞在冷凍和復(fù)蘇的時(shí)候都是最脆弱的,總會(huì)死掉一批。所以,一開始就要保證凍存細(xì)胞的數(shù)量足夠。

 

3、慢凍快融

一般情況下,細(xì)胞凍存時(shí)要遵循“慢凍快融"的原則。標(biāo)準(zhǔn)的降溫速度是1-2℃/min ,當(dāng)溫度到達(dá)-25℃,降溫速度可加快至5-10℃/min,到-80℃可直接入液氮。有些實(shí)驗(yàn)室是梯度凍存:4度,-20,-80,液氮,依次凍存。而復(fù)蘇速度越快越好。從液氮罐里取出來之后,迅速放在37°C水浴中,盡快融化

 

4、注意安全

細(xì)胞凍存和復(fù)蘇是細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)里面最容易出事的部分。凡是和液氮接觸的操作,注意戴保護(hù)眼鏡和手套。注意:復(fù)蘇的時(shí)候,在水浴中搖搖動(dòng)的時(shí)候會(huì)有爆炸的可能性。另外, DMSO是有毒致癌的。接觸的時(shí)候務(wù)必要帶好手套。

 

5、做好標(biāo)記

對(duì)于凍存細(xì)胞,一定要做好標(biāo)記。如:細(xì)胞名稱、代數(shù)和凍存日期。特別是公共實(shí)驗(yàn)室,更要做好標(biāo)記,避免找不到自己的細(xì)胞。

 

6、DMSO是否去除

由于DMSO是一種有毒致癌物質(zhì)。那么,解凍之后,應(yīng)不應(yīng)該去除凍存液中的DMSO呢?答案是no。除了極少數(shù)特別注明的對(duì)DMSO敏感的細(xì)胞外,99%的細(xì)胞都不需要去除DMSO。后面細(xì)胞培養(yǎng)中頻繁換液會(huì)慢慢去除掉DMSO。

 

 

聯(lián)


国产黄色成人自拍视频| 亚洲av小说最新在线观看网址| 国产精品一区二区av| 男人用嘴添女人下身免费视频| 国产猛男猛女超爽免费视频| 久久www免费人成_看片中文| 精品亚洲成在人线av无码| 色偷偷av老熟女| 少妇高潮毛片免费看| 亚洲午夜福利在线视频| 亚洲国产成人影院在线播放 | 国产一码二码三码区别| 777精品久无码人妻蜜桃| 精品无码一区二区三区电影| 国产精品后入内射日本在线观看| 久久无码av三级| 蜜桃久久精品成人无码av| 日韩精品中文字幕一线不卡| a在线视频v视频| 久久 国产 尿 小便 嘘嘘| 亚洲一区二区有码在线| 国产在线拍小情侣国产拍拍偷| 97精品人妻一区二区三区香蕉| 久久av无码精品人妻系列试探| 国产成人精品a视频| 新婚少妇无套内谢国语播放| 日日碰狠狠躁久久躁9| 国内精品久久人妻无码不卡| 精品久久久无码中文字幕| 天天做天天爱夜夜爽毛片毛片| 亚洲一区二区三区 无码| yy1111111少妇影院光屁股| 99精品国产一区二区青青性色| 亚洲国产a∨无码中文777| 亚洲成a人片在线观看无码| 精品少妇爆乳无码aⅴ区| 精产一二三产区m553| 少妇厨房愉情理9仑片视频| 少妇被粗大的猛烈进出视频| 永久免费AV无码国产网站| 欧美人与动性xxxxbbbb|